学术天麻最佳煎煮时间的探讨

天麻最佳煎煮时间的探讨

高晓玲,李光龙,王术玲,曾元儿

(广州中医药大学)

摘要: 目的:探讨天麻水溶性成分的煎出量与煎煮时间的关系。方法:采用高效液相色谱法,phenomenexC8(4.6mmx50mm,5um)色谱柱,流动相乙睛与0.%磷酸,梯度洗脱,流速mL/min,检测波长0nm。结果:天麻素在0.-3.ug线性关系良好(r=0.),平均回收率为99.4%,RSD.%,天麻在煎煮3h时天麻素等6个主要成分的煎出量最大。结论:天麻药材的最佳煎煮时间为3h,与传统要求的久煎相吻合。

关键词天麻天麻素煎煮时间高效液相色谱

中图分类号:R84.   文献标识码:A文章编号:-(03)03--03

天麻为兰科植物天麻GastrodiaelatesBl.的干燥块茎,又名赤箭、定风草、独摇兰。是平肝息风止痉的名贵中药,其药用历史达多年。临床广泛用于治疗头痛眩晕,肢体麻木,小儿惊风,癫痈抽搐,破伤风[]。现代研究表明天麻中主要含有酚类及其昔、有机酸类、含氮类、甾醇类及多糖类化合物,其中天麻素是天麻的主要成分,具有镇静催眠,抗惊厥,镇痛,保护神经,促智及延缓衰老等作用网。传统中药古籍记载天麻应久煎,日常生活人们也常用天麻炖猪脑。天麻的含量测定和质量分析方法主要是利用高效液相色谱法[9-]。对此,本实验通过高效液相色谱法测定不同煎煮时间下天麻水煎液中主要水溶性成分的含量探讨天麻有效成分的溶出与煎煮时间的关系。

仪器与试药

LC型高效液相色谱仪(上海天美科学仪器有限公司),MODELHN型超声清洗器(华南超声设备厂);BPD/0万电子天平(Sartorius公司)。对照品天麻素(中国药品生物制品检定所,批号),乙睛为色谱纯,液相用水为超纯水,其余试剂均为分析纯。天麻饮片购自安徽广印堂制药有限公司,经广州中医药大学曾元儿教授鉴定为兰科植物天麻的干燥块茎。

方法与结果.色谱条件

PhenomenexC8色谱柱(4.6mmx50mm,5um),以乙睛为流动相A,0.%磷酸溶液为流动相B,按表进行梯度洗脱,流速mL/min,检测波长0nm,进样量0uL。

表流动相的梯度洗脱表

t/min

流动相A/%

流动相B/%

0-0

3

97

0-40

3-30

97-70

.对照品洛液的制备

称取天麻素7mg精密称定,置50mL量瓶中,加流动相乙睛-水(3:97)溶解并稀释至刻度,摇匀,即得。

.3天麻水煎液的制备

精密称定天麻药材粗粉(过0目筛)5.g,共6份,分别置圆底烧瓶中,加水60mL,分别加热回流提取5,45,90,0,80,0min。提取液经滤布滤至00mL量瓶中,以水洗涤残渣并入提取液中,以水稀释至刻度,摇匀。

.4供试品溶液的制备

精密移取天麻水煎液mL,置0mL量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,放置过夜,取上清液,微孔滤膜滤过,取续滤液,即得。

.5方法学考察

.5.专属性考察按.项下色谱条件,精密吸取对照品溶液、供试品溶液各0uL,注入液相色谱仪,记录色谱图(图)。以天麻素峰计理论板数大于3,各共有峰分离度良好。

图天麻水煎液HPLC图

.5.线性关系考察分别精密吸取.项下对照品溶液各,,3,5,0mL,置0mL量瓶中,用甲醇稀释至刻度,摇匀,即得系列对照品溶液。分别精密吸取上述系列对照品溶液0uL,注入高效液相色谱仪,按拟定的色谱条件测定峰面积,以进样量(ug)对峰面积绘制标准曲线,计算回归方程Y=X-34(r=0.)。结果表明,在上述色谱条件下,天麻素在0.一3.ug与峰面积呈良好的线性关系。

.5.3精密度试验精密吸取对照品溶液0uL,连续进样6次,测定天麻素的峰面积,测得天麻素平均峰面积RSD0.7%,表明仪器精密度良好。

.5.4稳定性试验取同一供试品溶液,分别于0,,4,8,h进样,测定天麻素的峰面积,测得天麻素平均峰面积RSD.%,表明供试品溶液在h内稳定。

.5.5重复性试验精密移取天麻水煎液mL,按.4项下方法分别制备供试品溶液,精密吸取0uL,按.项下方法测定,天麻素的平均浓度为0.g/L,RSD.5%,表明本方法重复性良好。

.5.6加样回收率试验精密移取天麻水煎液mL,精密加入浓度为0.g/L天麻素对照品溶液mL,按.4项下制备方法操作见表,表明该法具有良好的回收率。

表加样回收率试验结果(n)

.6样品测定

取各提取时间下的天麻水煎液,按.4项下方法制备供试品溶液,精密吸取0uL,注入液相色谱仪中测定,计算天麻素的煎出量及以天麻素计6个特征成分(色谱图上标号为-6)的总煎出量,结果见图。

图天麻特征成分的煎出量与煎取时间的关系

3讨论

本法考察了煎煮时间对天麻药材中天麻素等6个主要水溶性特征成分煎出量的影响,得出天麻的最佳煎煮时间,解决了日常生活中煎煮天麻的时间问题,从而为合理利用中药药材资源提供参考依据。

本文利用梯度洗脱的方式对天麻水煎液中极性部分的成分进行分离,得到6个特征性成分,在研究煎煮时间对成分溶出的影响时,不但以天麻素单一成分为考察指标,还综合考虑了以天麻素计的6个特征性成分的总溶出量,研究结果更有说服力,也体现了中药多成分协同作用的特色。由研究结果可以看出,煎煮前h内天麻素的溶出量及6个特征成分的总溶出量均较少,在煎煮的第3h内天麻素及总成分的溶出量显著增加,在煎煮3h时达到最大值,随后煎煮时间延长,煎出量不再增加,说明天麻药材选择煎煮3h最佳。

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END

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